無論是選擇國產還是進口的qPCR儀,首先要從儀器光學檢測的技術方案來著手,因為這是qPCR 儀的核心技術,它決定了實驗的準確性、可靠性和重復性。一臺出色的qPCR儀需要具備哪些特點呢?
一、采用頂部檢測CCD技術
目前來看,頂部檢測CCD技術是定量PCR儀的最佳技術方案。國內頂尖qPCR儀和國外主流qPCR儀都采用這種技術,這種頂部檢測技術采用相機原理,直接從PCR管的上方對樣品進行實時檢測,采光面平行性好,采光面積大,因此小體積反應液都能放心使用。
眾所周知,采用頂部檢測技術的 qPCR儀所需要的反應體積只需5-10ul即可,(而其他檢測方案的qPCR儀至少需要20ul以上),從而很大程度地降低了實驗成本。實驗達人們最清楚qPCR試劑有多貴了,能省一半的試劑就是省下大把的銀子啊。
二、能用0.1ml白管
這里告訴你一個獲得最佳結果的訣竅——就是改變習慣,使用白管。因為不透明的白管能屏蔽背景噪音,即使樣品井有點臟都沒有關系。另外,白管還能減少光的折射損失,信噪比和靈敏度更高,因此可獲得比透明管更佳的實驗效果。頂部檢測CCD方案絕配白管,可實現1+1>2的優勢。
另外,0.1ml管由于光程比0.2ml管更短,因而熒光信號更穩定,靈敏度更高。
三、升降溫速率越快越好
無論是普通pcr儀還是熒光定量pcr儀,升降溫速率都決定了實驗所需的時間,當然是越快越好。能快速達到目標溫度,從而縮短實驗時間和提高工作效率肯定是一臺優秀的qPCR儀應具備的品質。而對于PCR儀的變溫速率來說,每秒增加1度都是半導體技術的一次飛躍。